一、什么是熒光標(biāo)記?
熒光標(biāo)記所依賴的化合物稱為熒光物質(zhì)。熒光物質(zhì)是指具有共軛雙鍵體系化學(xué)結(jié)構(gòu)的化合物,受到紫外光或藍(lán)紫光照射時(shí),可激發(fā)成為激發(fā)態(tài),當(dāng)從激發(fā)態(tài)恢復(fù)基態(tài)時(shí),發(fā)出熒光。熒光標(biāo)記技術(shù)指利用熒光物質(zhì)共價(jià)結(jié)合或物理吸附在所要研究分子的某個(gè)基團(tuán)上,利用它的熒光特性來(lái)提供被研究對(duì)象的信息。熒光標(biāo)記的無(wú)放射物污染,操作簡(jiǎn)便等優(yōu)點(diǎn),使得熒光標(biāo)記物在許多研究領(lǐng)域的應(yīng)用日趨廣泛。
二、熒光標(biāo)記的作用
熒光標(biāo)記物質(zhì)在蛋白的功能研究、藥物篩選等領(lǐng)域也有著廣泛的應(yīng)用。人們利用利用熒光標(biāo)記的多肽來(lái)檢測(cè)目標(biāo)蛋白的活性,并將其發(fā)展的高通量活性篩選方法應(yīng)用于疾病治療靶點(diǎn)蛋白的藥物篩選和藥物開(kāi)發(fā)(例如,各種激酶、磷酸酶、肽酶等)。因此,多肽的熒光修飾,同樣是多肽合成領(lǐng)域的重要內(nèi)容。
三、熒光標(biāo)記的位點(diǎn)
熒光標(biāo)記物質(zhì)可以直接和多肽的N端直接相連(如異硫氰酸熒光素的連接, 通常在多肽的N端和異硫氰酸熒光素直接插一個(gè)氨基乙酸或者β-丙氨酸。),或者在C端和賴氨酸(或半胱氨酸)的側(cè)鏈連接、或者在其它可以連接的位子連接。
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